Клиническая ангиология

- заболевания артерий и вен воспалительного и невоспалительного характера, этиология и патогенез, клиника и диагностика, лечение и профилактика сосудистых заболеваний.

  • Увеличить размер шрифта
  • Размер шрифта по умолчанию
  • Уменьшить размер шрифта

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Латинское serum - сыворотка - изучение сыворотки крови человека или животных с целью обнаружения специфических антител. Серологические исследования находят самое широкое применение в инфекционной патологии для установления диагноза (серодиагностика), анализа клинического течения заболевания и постинфекционного иммунитета.

В эпидемиологии серологические исследования используют для идентификации возбудителя при вспышке, с целью выявления источников инфекции, природных резервуаров возбудителей (вирусных заболеваний, риккетсиозов, бруцеллеза, туляремии, лептоспироза и т. д.), состояния коллективного иммунитета и эффективности вакцинации. Серологические исследования применяют также для определения групп крови, видовой и индивидуальной специфичности белков, в диагностике аутоиммунных заболеваний и др.

Серологические исследования осуществляются при помощи реакций, в основе которых лежит специфическое взаимодействие антигена и антитела (Антигены, Антитела). Принято условно рассматривать серологические реакции как двуфазные [Бойд (В. Boyd), 1963], причем первая из них - в момент возникновения специфического комплекса - не сопровождается видимыми проявлениями. Эту фазу реакции удается зафиксировать лишь при использовании маркированного флюорохромом по методу Кунса антитела или антигена [люминесцентно-серологический, или иммуно-флюоресцентный, метод (И. Ф. Михайлов, С. И. Дьяков, 1961)]. Остальные серологические реакции основаны на регистрации физико-химических или патофизиологических процессов, происходящих после образования специфического комплекса in vitro и in vivo.

К прямым серологическим реакциям, сопровождающимся уменьшением растворимости и снижением электрического заряда комплекса антиген - антитело, относятся реакции агглютинации (гемагглютинации) и пассивной гемагглютинации (Агглютинация, Гемагглютинация). Во всех случаях корпускулярные антигены (взвесь живых или убитых микроорганизмов, эритроцитов, нативных или с фиксированными на их поверхности антигенами) под действием специфической сыворотки склеиваются (агглютинируют). Указанные реакции имеют самое широкое применение в диагностике разнообразных инфекционных заболеваний: брюшного тифа (Видаля реакция), бациллярной дизентерии, бруцеллеза (Райта реакция), сыпного тифа (Вейля - Феликса реакция), при определении групп крови. Реакция пассивной гемагглютинации нашла также применение в диагностике аллергических заболеваний [Сихон (А. Н. Sehon), 1962].

При использовании растворимых антигенов (полного бактериального антигена, vi-антигена, белковых токсинов, спиртового экстракта мышцы бычьего сердца - кардиолипина) взаимодействие со специфическим антителом сопровождается феноменом преципитации (флоккуляции). Реакция преципитации является одним из важнейших тестов серологического анализа, применяемого, в частности, при диагностике сибирской язвы (Асколи реакция), дизентерии, сифилиса (Мейнике реакции), малярии, изучении патологических белков сыворотки крови, опухолевых антигенов.

К сложным серологическим реакциям относится реакция связывания комплемента (Борде - Жангу реакция). Образование специфического комплекса антиген - антитело сопровождается связыванием введенного в реакцию комплемента, об убыли которого судят при помощи реакции гемолиза (лизиса бараньих эритроцитов, наступающего в присутствии гемолитической сыворотки и комплемента). РСК используется при диагностике сифилиса, гонореи, бруцеллеза, токсоплазмоза, риккетсиозов, вирусных инфекций.

В случае взаимодействия антител с подвижными формами микроорганизмов иммобилизация последних может служить тестом образования специфического комплекса антиген - антитело (например, реакция иммобилизации бледной трепонемы - РИБТ).

Возникновение комплекса антиген - антитело может быть зарегистрировано при проведении опытов не только in vitro, но и in vivo. Так, при титровании антитоксинов сыворотку смешивают с соответствующим токсином in vitro, после чего определяют на животных степень нейтрализации токсина по летальному эффекту последнего (например, столбнячного или ботулинического токсина) или по его кожно-некротическому действию (реакция Йенсена для дифтерийного токсина, реакция Шика - Дика для скарлатинозного токсина). При изучении защитных свойств противобактериальных сывороток (например, к Salmonella typhi) титрование проводят в опытах in vivo на белых мышах. Первоначально животным вводят исследуемую сыворотку в серии разведений, затем летальную дозу живой взвеси микробов. Титр сыворотки выражают в РД50- разведении титруемой сыворотки, защищающем 50% взятых в опыт животных (Б. Н. Козьмин-Соколов, 1957).

При оценке специфичности многих серологических систем находят все более широкое применение проводимые in vivo реакции пассивной анафилаксии и пассивной кожной анафилаксии (Анафилаксия).

В первом случае испытуемую сыворотку вводят подкожно морским свинкам, после чего через 4-48 часов вводят внутривенно антиген. При образовании специфического комплекса у животных развивается картина анафилактического шока. Во втором случае сыворотку вводят внутрикожно. Последующее внутривенное введение антигена в смеси с нейтральным красителем приводит к образованию на месте введения сыворотки окрашенной зоны воспаления.

Указанные реакции нашли применение, в частности, при изучении антигенного строения опухолей (Л. А. Зильбер, Г. И. Абелев, 1962).

Серологические реакции существенно различаются по своей чувствительности. При сопоставлении в одной и той же тест-системе (сывороточный альбумин человека - кроличья антисыворотка) показано, что при помощи РСК удается открыть в 150-200 раз меньшие количества антигена, чем в реакции преципитации. Реакция пассивной гемагглютинации чувствительнее реакции преципитации в 800 раз.

Чувствительность некоторых серологических реакций существенно зависит от характера присутствующих в антисыворотке антител. Так, антитела, относящиеся к 19S макроглобулинам, и появляющиеся первыми в процессе иммунизации, являются в несколько десятков раз более эффективными в реакции гемагглютинации, чем 7S гамма-глобулины сыворотки [Гринбери, Мур, Нанн (С. L. Greenbury, D. Н. Moore L. А. С. Nunn), 1963].

При проведении серологических исследований в диагностических целях во многих случаях наблюдаются низкие титры антител. Диагноз допустимо считать установленным только с учетом среднего титра, обнаруживаемого у данной группы населения в нормальных условиях, и принимая во внимание анамнез исследуемого больного (перенесенные заболевания, возможность профилактической вакцинации). Так, при диагнозе брюшного тифа титр Н-агглютининов считают положительным, если он не ниже 1:250. При титровании О-агглютининов в том случае, если больной ни разу не вакцинировался, а клинические симптомы указывают на брюшной тиф, положительной можно считать реакцию агглютинации с титром 1 : 80.

Особое положение складывается при серологических исследованиях, когда в силу особенностей антигена и антитела они не дают некоторых серологических реакций. В этом случае возникает необходимость в постановке нескольких реакций с целью получения наиболее четких результатов. Так, скарлатинозный токсин не дает реакции флоккуляции, но отчетливо реагирует с антисывороткой в РСК. Противостолбнячные антитоксические сыворотки лошадей, как правило, обладают чрезвычайно слабой флоккулирующей активностью. Их не удается титровать в РСК, поскольку сыворотки лошадей отличаются антикомплементарностью. В силу этого наиболее отчетливые результаты при определении антитоксина в подобных сыворотках могут быть получены при их титровании in vivo. При изучении реагинов, не взаимодействующих in vitro в осадочных реакциях и РСК, с успехом может быть использована реакция пассивной гемагглютинации.

А. Кульберг.